3.3 差异蛋白通路富集分析 20

3.4 差异蛋白PPI相互作用网络图 21

4 讨论 21

图目录

图 3 2脾肾阳虚证组特征性差异蛋白的GO分析图 20

图 3 3脾肾阳虚证组特征性差异蛋白的KEGG图 20

图 3 4儿童哮喘中医证候特征性蛋白的PPI相互作用网络图 21

表目录

表 2 1样本的临床资料分析 5

表 2 2 SCX分级方案表 7

表 3 1脾肾阳虚证组儿童哮喘血清同位素标记相对和绝对定量分析特征性差异蛋白 10

1引言

支气管哮喘是儿童中常见的一种气道炎症，也是一种慢性呼吸系统疾病。哮喘由遗传因素和环境因素多种条件作用下产生，其确诊及治疗都具有一定的困难。由于近年来生活模式的改变使支气管哮喘的致敏原和诱发原因不断增多。根据世卫组织统计，全球范围内罹患支气管哮喘的患者数量每年都在上升，其中，小儿支气管哮喘的患病情况则尤为严重[1]。持续反复发作的哮喘会影响儿童的生长发育和正常生活，给家庭社会带来巨大的心理和经济负担。

儿童哮喘难以治愈的原因有很多：(1)经过治疗后的患儿会进入肺功能表现正常的稳定期，但仍会有持续性的慢性气道炎症，从而导致儿童哮喘久治不愈，屡屡复发[2]；（2）目前的哮喘治疗手段主要是激素治疗（吸入性糖皮质激素ICS），虽然该激素在哮喘发作期有良好的治疗效果，但有研究表明，糖皮质激素治疗后的儿童在后期的跟踪治疗中，并没有得到良好的治愈，其病情仍会复发[3]。（3）儿童处于生长发育的黄金时期，过度使用激素可能会产生其他较为严重的副作用；（4）哮喘患儿若不能接受专业医师的监督治疗，会引起因患者或家属的恐惧心理导致的用药不当的情况。有研究表明[4]，有三分之一的哮喘患儿的病情反复发作是由治疗不当而导致的。

我国医学将哮喘纳入“哮病”范畴，对哮喘的治疗有着悠久的历史。其治疗哮病的经验颇丰，方剂用药多变灵活且有据可循。中医将小儿哮喘按发作期和缓解期（稳定期）分别施治。其中，发作期包括四种证候，缓解期包括三种证候[5-6]。在此基础上只要医师辨清患者所属证候，确定治法治则，依此给以对应的方药治疗，即可达到治疗效果。

目前，哮喘病症的评估主要通过其临床症状，肺功能以及治疗效果来进行综合分析。传统中医证候分型时，存在许多主观因素，会造成一些诊断和治疗上的偏倚。中医辩证施治的核心是证候，若不能正确辩证则无法正确治疗。然而，目前中医的儿童哮喘稳定期证候分型无统一、规范、客观化的标准，辩证的准确性和重复性都依靠于临证者的经验和学识，从而严重影响中医小儿哮喘的临床治疗效果。因此，不能将中医证候的辩证依据根据科学标准量化，或是证候分辨不能统一，小儿哮喘的中医诊疗必将受到严重的阻碍。

支气管哮喘是呼吸道疾病中的一种慢性炎症，在其发作过程中有多种细胞组分参与，从而产生不同的疾病标志物，如蛋白质。蛋白质是机体炎症反应中重要的因子，蛋白标志物浓度会随炎症反应的严重程度而改变，是一种很好的评估哮喘病情的工具。但支气管哮喘是一种复杂的炎症反应，其中包含着多种症状，并不能通过单一的蛋白标志物来判定病情。传统蛋白组学方法（如：2D差异凝胶电泳等）具有许多缺点。例如，电泳方法不能分离小分子或痕量蛋白，且不能够很好的分离极酸性和极碱性的蛋白、在相同条件下的蛋白分离重复性不高等[7]。但是新兴的蛋白组学技术完善了这些问题，稳定同位素标记蛋白组学(iTRAQ stable isotope labeling, two-dimensional liquid chromatography, nanoelectrospray ionization and high resolution tandem mass spectrometry using the hybrid QqTOF platform，iTRAQ-2DLC-MS/MS)技术，它将iTRAQ稳定同位素标记技术、二维液相色谱技术和串联质谱技术联用的定量蛋白组学技术平台。该技术能直接鉴定蛋白质的分子量信息，因此可直接对差异表达的蛋白质作分析鉴定；iTRAQ试剂能针对所有蛋白质进行标记，全面对血清中的潜在标志蛋白质进行筛选[8]。iTRAQ技术已在各方面有其使用报道，并为蛋白组学的发展提供了很大帮助。在研究如肺结核病[9]，风湿性疾病[10]，肾脏疾病[11]，直肠癌等[12-13]疾病时均有报道。卢洪华等学者在鉴定稳定期儿童差异血清蛋白时使用了MALDI-TOF MS技术为筛选稳定期哮喘儿童的标志物蛋白提供了基础[14]。但目前尚未见应用iTRAQ-2DLC-MS/MS技术应用儿童哮喘中医证候标准化研究的报道。血清蛋白质组学技术具有复杂性，多态性和整体性等特征，而中医证候也恰好具有这些特点。所以若要动态地从微观的角度认识了解证候的物质基础，从血清蛋白组入手，对证候实质进行深入研究，一定可以使中医证候的客观分型变得更为简洁明了。 定量蛋白组学技术筛选脾肾阳虚证儿童哮喘特征性蛋白(2):http://www.chuibin.com/yixue/lunwen_205895.html