枸杞蜂花粉糖蛋白文献综述和参考文献(3)
3 提取与分离纯化方法
目前对于花粉破壁，常见的方法是机械破壁法、仿生破壁法、酶破壁法等。日本对花粉加工工艺技术专利有9个，其中古越章的昭56-20823专利、昭55-18专利以及昭56-17897专利等，就是利用不同形式的酶处理花粉技术，Z•P酶法破壁是采用复合酶对花粉壁进行酶解的，它化繁为简，把破壁、脱敏、灭菌、除异、采取进一步而成的方法[9]。破壁之后提取糖蛋白的方法有很多，如热水提取法，酶法，超临界流体提取法，在提取要注意进行预处理，如脱脂获除去多酚类物质。经过分离后的样品首先要除去游离蛋白，一般用Sevag法，但含糖量少的糖蛋白可以不用这一步，避免目标糖蛋白的损失，然后用柱色谱的手段进一步分离纯化，常压柱色谱可以使用阴离子交换色谱柱、葡聚糖凝胶柱、琼脂糖凝胶柱等[10]。本次实验中，我们主要采用的是热水提取法和超声波辅助提取法提取糖蛋白。热水提取法的提取溶剂选用热水，根据提取物的性质选用不同温度的热水和提取时间。热水提取法操作简单，无需特殊仪器，且节约成本。超声波提取法主要通过压电换能器产生的快速机械振动波来减少目标物与杨品间的作用力，从而实现分离。超声波法简便，操作简单，易于实现，相比于传统方法，较节省时间等。
4 总结
综上所述，糖蛋白具有非常广阔的应用前景，虽然国际上已经是比较热门的领域，但是国内的起步比较晚，不管是在结构测定还是生物活性确定等方面，我们与发达国家还有一定的差距。经过已有的大量的科学研究表明，我国许多传统的中草药中的多糖具有比较大的应用价值，比如说有香菇多糖、山楂蜂花粉多糖、山茶蜂花粉多糖等等。枸杞作为一种最常见且有巨大功效的中草药，目前鲜有对其蜂花粉糖蛋白的提取、分离纯化和研究，因此，从枸杞蜂花粉中提取糖蛋白具有实际意义。
本课题结合目前已有的研究，以枸杞蜂花粉为对象，研究其提取和分离纯化的方法，为后续的研究其生物活性做好准备。促进传统中草药的深加工，加快其产业化的建设。
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