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枯草芽孢杆菌表达鸡α干扰素的初步研究(3)

时间:2024-12-23 22:18来源:99290
1.3.2抗生素类 Ampicillin(氨苄青霉素):用灭菌ddH2O配制。浓度为50mg/mL,0.22um滤器过滤除菌,-20℃保存备用。 Neomycin(新霉素):用灭菌ddH2O配制。浓度为

1.3.2抗生素类

Ampicillin(氨苄青霉素):用灭菌ddH2O配制。浓度为50mg/mL,0.22um滤器过滤除菌,-20℃保存备用。

Neomycin(新霉素):用灭菌ddH2O配制。浓度为10mg/mL,0.22um滤器过滤除菌,-20℃保存备用。

1.3.3碱裂解法提质粒相关试剂

SolutionⅠ:组分浓度为25mmol/LTris-HCl(pH8.0),10mmol/LEDTA,50mmol/LGlucose,110℃高压灭菌后,4℃保存备用。

SolutionⅡ:组分浓度为200mmol/LNaOH,1%SDS,使用时最好新鲜配制,室温保存。

SolutionⅢ:组分浓度为3mol/LKoAc,5mol/LCH3COOH

1.3.4 SDS-PAGE电泳相关试剂5×Tris-GlycineBuffer(电泳缓冲液):15.1gTris,94gGlycine,5.0gSDS,加入800mL的去离子水溶解,定容至1L后室温保存备用。

5×SDS-PAGELoadingBuffer(上样缓冲液):1.25mL1mol/LTris-HCl(pH6.8),0.5gSDS,25mgBPB,2.5mL甘油,加去离子水溶解后定容至5mL,每1mL分装至1.5EP管中,-20℃保存。使用前每份加入50uLβ巯基乙醇。

考马斯亮蓝染色液:45mL甲醇,45mL水,10mL冰乙酸,0.25g考马斯亮蓝R250。考马斯亮蓝脱色液:100mL冰醋酸,50mL无水乙醇,加去离子水补足至1L。1.3.5 WestonBlot相关试剂

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